Laboratorieteknikker

Journal of Visualized Experiments in several categories for example cellular biology, immunology, medicine etc.

ELISA
ELISA eller Enzyme Linked Immunosorbent Assay er en teknik som anvendes i laboratoriet til kvantitative og kvalitative analyser af antigener og antistoffer. Det antigen (analyt) der skal måles bindes til et antistof bundet til overfladen af en plastbrønd. Herefter tilsættes et detektionsantistof med et enzym. Enzymet giver et farvesignal, der tillader en kvantificering af analytten.
ELISA er det grundliggende værktøj i klinisk immunologi.

Luminex
Luminex teknologien er en blanding af ELISA og flowcytometri. Styrken ved Luminex teknologien er kugler (beads), der er nemme at coate med et antistof, der er rettet mod den analyt, der skal testes for. Der findes 100 unikt farvekodede kugler, hvilket gør det muligt simultant at måle op til 100 analytter pr. brønd med en lille mængde prøvemateriale.

Immunhistokemi
Ved immunhistokemi forstås en metode til påvisning af specifikke antigener i væv. Dette gøres ved hjælp af antistoffer rettet mod de pågældende antigener. Princippet i alle immunhistokemiske teknikker er, at et antistof tilsættes et vævssnit hvor det binder sig til det antigen det er rettet mod, såfremt det er til stede i vævet. Herefter påvises antigen-antistof bindingen ved hjælp af et detektionssystem, der giver mulighed for at registrere lokaliseringen.

Tissue Microarray
Man producerer Tissue Microarrays ved at flytte væv fra flere almindelige histologiske paraffinblokke til en såkaldt donor paraffinblok. Dette giver mulighed for at samle væv fra utallige patienter på blot et slide. Der anvendes en hul nål til at fjerne vævsbiopsier (kaldet cores) fra udvalgte områder af vævet, der oftest bliver lokaliseret ved en Hematoxylin farvning. Disse cores kan være så små som 0.6 mm, og placeres i nøjagtig definerede koordinater på donorblokken.
Snit fra en microarray blok er egnet til mikrotom skæring samt efterfølgende immunhistokemisk farvning.

Konfokalmikroskopi
Med et konfokalmikroskop forenes mange forskellige teknikker, nemlig mikroskopi, laserteknologi og optik til kohærent lys, videoteknologi, elektronik og computerteknologi.
Teknikken hviler på anvendelse af fluorescensprober til markering af forskellige organiske og uorganiske molekyler i cellen. Ved at tage forskellige snit af f.eks. en celle kan en 3D-struktur af cellen skabes og lokalisation af specifikke molekyler identificeres. Konfokal mikroskopi kan bruges til at få indblik i celler, komplekse væv og organer.

Celledyrkning
Ved celledyrkning gælder det om at undgå antallet af tilfældige infektioner i cellekulturen derfor er brugen af LAF-bænke obligatorisk til enhver form for celledyrkning. Derudover er cellernes vækst afhængig af den rette temperatur og iltmætning hvilket opnås i en CO2- inkubator.
Dyrkning af celler in vitro er en teknik der f.eks. anvendes til produktion af virus.

DNA-kloning
DNA-kloning er en teknik, hvor kun en del af en organismes arveanlæg (typisk et enkelt gen), kopieres og indsættes i en anden organisme, kaldet en kloningsvektor. Resultatet bliver et såkaldt rekombinant DNA-molekyle, der under optimale betingelser kan opformeres.
Som kloningsvektor benyttes ofte plasmider fra E. coli bakterien.

Gelelektroforese
Protiner, DNA og RNA-molekyler kan adskilles efter størrelse og ladning ved hjælp af gelelektroforese. Til adskillelsen af molekylerne bruges enten agarose- eller polyakrylamid-geler,
der er placeret i et elektrisk felt.

Western blotting
Western blot teknikken gør det muligt at teste tilstedeværelsen af et specifikt protein i en opløsning med mange forskellige proteiner.

Real time PCR
PCR teknikken kan frembringe millioner af molekylekopier af en given DNA-sekvens. Real Time PCR er en avanceret PCR-metode, hvor man kan følge med i, hvordan reaktionen forløber, mens maskinen kører. Dette giver mulighed for kvantificering af det RNA eller DNA som er udgangspunkt for reaktionen.

TC_ID50
TC_ID50, som står for "50% Tissue Culture Infective Dose", er en metode til at bestemme den mængde af virus der skal benyttes for at inficere 50% af cellerne.

Kromatografi
Kromatografi benyttes til protein arbejde, herunder kvantificering og oprensning.